پپتیدهای بیوتینیله|سنتز پپتید بیوتینیله|پپتیدها برای تصفیه میل ترکیبی|علم-پپتید

 

توضیحات متا

 

به پپتیدهای بیوتینیله برای خالص سازی میل ترکیبی یا الایزا نیاز دارید؟ Science-پپتید خدمات حرفه‌ای پپتیدهای بیوتینیله را ارائه می‌کند، از N-ترمینال، C{2}}ترمینال، زنجیره جانبی لیزین-و سایر سایت‌ها{4}}برچسب‌گذاری خاص، خلوص بالا، تحویل سریع، پشتیبانی می‌کند.

 

در تحقیقات علوم زیستی و توسعه معرف های تشخیصی، پپتیدهای بیوتینیله برای خالص سازی میل ترکیبی، الایزا، فلوسیتومتری، ایمونوهیستوشیمی، و سناریوهای تجزیه و تحلیل برهمکنش های مولکولی ایده آل هستند، زیرا میل ترکیبی فوق العاده بالایی برای آویدین یا استرپتاویدین ارائه می دهند. پپتیدهای بیوتینیله با بیش از 20 سال تجربه در سنتز پپتید، Science-پپتید پپتیدهای بیوتینیله سفارشی شده با کیفیت بالا - را از انتخاب مکان‌های برچسب‌گذاری، انواع اصلاحات بر اساس الزامات خلوص در اختیار شما قرار می‌دهد، ما طراحی را مطابق با آزمایش‌های آزمایشی شما انجام می‌دهیم تا اطمینان حاصل کنیم که می‌توان از هر بیوتینیل در سناریوهای کاربردی شما استفاده کرد. پپتیدها با توجه به کاربرد شما سفارشی می شوند تا اطمینان حاصل شود که هر پپتید بیوتینیله شده در آزمایشات شما پایدار است. چه در مقادیر میلی‌گرمی برای تحقیقات و چه در مقادیر گرم برای معرف‌های تشخیصی، ما از قوام و ثبات فعالیت دسته‌ای{11}تا{12}}پپتیدهای بیوتینیله اطمینان می‌دهیم.

 

پپتیدهای بیوتینیله چیست؟

 

پپتیدهای بیوتینیله مولکول‌های بیوتین (بیوتین) هستند که به صورت کووالانسی شیمیایی به موقعیت‌های خاصی در یک توالی پپتیدی متصل شده‌اند. بیوتین (ویتامین B7) یک مولکول کوچک (وزن مولکولی 244.31 Da) با ثابت اتصال تا 1015 M-1 به پروتئین‌های خانواده میل ترکیبی (افینومایسین، استرپتاویدین)، یکی از قوی‌ترین فعل و انفعالات غیرکووالانسی شناخته شده در طبیعت است. این ویژگی پپتیدهای بیوتینیله را قادر می‌سازد تا مولکول‌های هدف را در سیستم‌های پیچیده بیولوژیکی به‌طور موثر جذب کنند یا به عنوان پروب برای تشخیص و تصویربرداری استفاده شوند. در آزمایش‌های خاص، انتخاب پپتیدهای بیوتینیله اغلب به دسترسی فضایی مولکول‌های هدف و سازگاری سیستم آزمایشی بستگی دارد.

 

با توجه به سایت های مختلف برچسب گذاری، پپتیدهای بیوتینیله را می توان به صورت زیر طبقه بندی کرد:
N-بیوتینیلاسیون پایانی: بیوتین به -گروه آمینو پپتید متصل است و به پپتیدهایی که N-گروه پایانی آنها در فعالیت عملکردی دخیل نیست اعمال می‌شود.
C{0}}بیوتینیلاسیون پایانی: بیوتین به انتهای کربوکسیل پپتید (معمولاً از طریق یک لیزین یا یک سیستئین اضافه شده) متصل می‌شود و برای سیستم‌های C{1} در معرض انتهایی مناسب است.
بیوتینیل‌سازی زنجیره جانبی: بیوتین متصل به ε{1}گروه آمینو لیزین (Lys)، گروه سولفیدریل سیستئین (Cys) یا سایر اسیدهای آمینه غیر طبیعی-برچسب‌گذاری چند سایت را ممکن می‌سازد.

معرفی بازوهای اسپیسر: افزودن بازوهای فاصله‌دهنده با طول‌های مختلف (به عنوان مثال. 6-آمینو هگزانوئیک اسید، زنجیره PEG) بین بیوتین و پپتید می‌تواند به طور موثر مقاومت فضایی را کاهش دهد و کارایی اتصال را بهبود بخشد، که به‌ویژه برای آزمایش‌های بر اساس میل ترکیبی مناسب است.

page-800-600

 

علوم-پپتیدهای بیوتینیله شده با پپتید، شایستگی های اصلی

 

1. سایت های برچسب گذاری متعدد در دسترس است
ما از سنتز پپتیدهای بیوتینیله در N-ترمینال، C-ترمینال، زنجیره جانبی لیزین، زنجیره جانبی سیستئین و سایر سایت‌ها پشتیبانی می‌کنیم. برای کاربردهایی که باید ترکیب طبیعی پپتید حفظ شود، ما به شما کمک می‌کنیم تا مناسب‌ترین موقعیت برچسب‌گذاری را انتخاب کنید تا از تداخل با حوزه عملکردی جلوگیری کنید. به عنوان مثال، برای پپتیدهای سوبسترای آنزیمی، معمولاً توصیه می کنیم پپتید بیوتینیله شده را در انتهای دور از محل برش برچسب گذاری کنید.

 

2. طراحی بازوی فضایی انعطاف پذیر
برای کاربردهایی که نیاز به کاهش مقاومت فضایی دارند (مثلاً آزمایش‌های ضبط بر روی صفحه‌های میل- محصور شده)، می‌توانیم بازوهای فاصله‌دهنده با طول‌های مختلف (Ahx، PEG2، PEG4، PEG12، و غیره) را معرفی کنیم تا امکان قرار گرفتن در معرض انعطاف‌پذیرتر از مولکول‌های بیوتین و بهبود کارایی اتصال را فراهم کنیم. در برخی از آزمایشات SPR درخواستی، طول بازوی مناسب اغلب کلید موفقیت آزمایش است، ما بهترین راه حل را با توجه به طراحی آزمایشی شما توصیه می کنیم.

 

3. خلوص بالا و شخصیت پردازی کامل
هر پپتید بیوتینیله شده توسط HPLC خالص شد و با طیف سنجی جرمی (MS) مشخص شد تا اطمینان حاصل شود که پپتید بیوتینیله شده به درستی متصل شده است و از محصولات باقیمانده باقی مانده است. برای توالی های حاوی چندین سایت واکنش، از یک استراتژی حفاظت متعامد استفاده می کنیم تا اطمینان حاصل کنیم که تغییرات در مکان های تعیین شده رخ می دهد. گزارش های دقیق COA، از جمله خلوص، وزن مولکولی، و تایید محل اصلاح، پس از تحویل ارائه می شود. برای کاربردهای حیاتی، داده‌های اعتبارسنجی فعالیت اتصال بیوتین نیز می‌تواند ارائه شود.

 

4. انعطاف پذیر در اندازه
از مقادیر میلی گرمی برای تحقیقات علمی گرفته تا مقادیر گرمی برای معرف های تشخیصی، ما قادر به ارائه تولید پایدار هستیم. برای پروژه‌هایی که نیاز به عرضه بلندمدت دارند، می‌توانیم توافق‌نامه‌های دسته‌ای امضا کنیم تا از سازگاری دسته‌ای-به-دسته‌ای اطمینان حاصل کنیم. ما چندین سال است که پپتیدهای بیوتینیله را به تعدادی از شرکت‌های معرف‌های تشخیصی با یک CV عرضه می‌کنیم.<5% between batches.

 

5. سازگار با طیف گسترده ای از ترکیب های اصلاح
اصلاح بیوتین را می توان همزمان با سایر اصلاحات (به عنوان مثال، برچسب زدن فلورسنت، فسفوریلاسیون، گلیکوزیلاسیون، PEGylation، و غیره) معرفی کرد تا الزامات برچسب گذاری متعدد را برآورده کند. به عنوان مثال، پپتیدهای برچسب‌دار دوگانه با بیوتین و FITC می‌توانند برای گرفتن میل ترکیبی و تشخیص فلورسانس به طور همزمان استفاده شوند، در حالی که ترکیبی از اصلاحات بیوتین و فسفوریلاسیون می‌تواند برای غربالگری آنتی‌بادی‌های خاص فسفوریلاسیون استفاده شود.

 

پارامترهای فنی و قابلیت های سفارشی سازی

 

پارامترها

توضیحات

طول پلی پپتید

2-189 اسید آمینه

سایت های نشانگر

N-ترمینال، C-ترمینال، زنجیره جانبی Lys، زنجیره جانبی Cys، سایر اسیدهای آمینه غیر طبیعی

بازوی فاصله

هیچ، Ahx (6-aminohexanoic اسید)، PEG2، PEG4، PEG12، دیگر سفارشی

نوع بیوتین

بیوتین معمولی، بیوتین-PEG، بیوتین-XX (بازوی بلند)

مقیاس مصنوعی

میلی گرم، گرم، صد گرم

سطح خلوص

>70%, >75%, >80%, >85%, >90%, >95%, >98% اختیاری

برنامه کنترل کیفیت

خلوص HPLC، تایید وزن مولکولی MS

شکل تحویل

پودر لیوفیلیزه (لوله یا بطری)

 

کاربردهای رایج پپتیدهای بیوتینیله

 

1. تصفیه میل ترکیبی
پپتیدهای بیوتینیله تثبیت شده روی رزین استرپتاویدین را می توان برای خالص سازی پروتئین های هدف یا آنتی بادی هایی که به طور خاص به آنها متصل می شوند استفاده کرد. این روش ملایم و کارآمد است و به طور گسترده در مطالعات برهمکنش پروتئین استفاده می شود. ما پپتیدهای بیوتینیله را برای یک مشتری سنتز کرده‌ایم تا فاکتور رونویسی تازه کشف‌شده‌اش را خالص کند، و نرخ خالص‌سازی در یک نوبت 30 درصد افزایش یافت.

 

2. الایزا با روش میکروپلیت
پپتیدهای بیوتینیله را می توان به عنوان آنتی ژن های محصور شده یا پروب های ضبط برای تشخیص رنگ سنجی همراه با آنزیم استرپتاویدین (SA{1}}HRP) برای غربالگری آنتی بادی، شناسایی اپی توپ، یا تشخیص بیماری های خودایمنی استفاده کرد. انواع گزینه های بازوی فاصله دهنده برای بهینه سازی حساسیت سنجش موجود است.

 

3. فلوسیتومتری و مرتب سازی سلولی
با برچسب گذاری گیرنده های سطح سلولی با پپتیدهای بیوتینیله و افزودن استرپتاویدین نشاندار شده با فلورسنت، می توان به تجزیه و تحلیل کمی و کیفی گیرنده ها یا مرتب سازی سلول های مغناطیسی دست یافت. برای چنین کاربردهایی، ما استفاده از پپتیدهای بیوتینیله شده با بازوهای فاصله‌دهنده PEG را برای به حداقل رساندن مقاومت فضایی توصیه می‌کنیم.

 

4. تشدید پلاسمون سطحی (SPR) و تداخل بیوفیلم (BLI)
پپتیدهای بیوتینیله تثبیت شده بر روی تراشه های حسگر استرپتاویدین را می توان برای تجزیه و تحلیل سینتیک اتصال پپتیدها به پروتئین های هدف در زمان واقعی مورد استفاده قرار داد، که یک روش رایج برای غربالگری دارو است. ما پپتیدهای بیوتینیله شده با کیفیت بالا را برای تجزیه و تحلیل SPR به بسیاری از شرکت های دارویی با قابلیت تکرارپذیری عالی داده ها ارائه کرده ایم.

 

5. ایمونوهیستوشیمی و رنگ آمیزی بافت
پپتیدهای بیوتینیله شده می توانند به عنوان پروب برای شناسایی اهداف خاص در بخش های بافتی و تقویت سیگنال با ترکیب آنها با آنزیم نشاندار استرپتاویدین استفاده شوند. برای نمونه‌های پیچیده مانند بخش‌های پارافین، پپتیدهای بیوتینیله شده با بازوی فاصله‌دهنده بلند را برای بهبود رنگ‌آمیزی پیشنهاد می‌کنیم.

 

6. پایین بکشید- همراه با طیف سنجی جرمی
پپتیدهای بیوتینیله شده را می توان برای "پایین کشیدن" پروتئین های متقابل از لیزهای سلولی و شناسایی شرکای اتصال جدید با طیف سنجی جرمی استفاده کرد. پپتیدهای بیوتینیله شده در یک گزینه برچسب گذاری بیوتین موجود هستند که با سیگنال طیف سنجی جرمی تداخلی ندارد.

 

فرآیند سنتز پپتیدهای بیوتینیله

 

01/

ارتباط نیازها
توالی پپتید، محل برچسب‌گذاری مورد نظر، الزامات بازوی فاصله‌دهنده، سطح خلوص و دوز را ارائه می‌دهید. ما می توانیم بهترین راه حل برچسب زدن را با توجه به درخواست شما توصیه کنیم. به عنوان مثال، برای سیستم سنجشی که به حساسیت بالایی نیاز دارد، استفاده از پپتیدهای بیوتینیله شده با بازوی فاصله‌دهنده PEG را توصیه می‌کنیم.

02/

طراحی مصنوعی
استراتژی حفاظتی مناسب را با توجه به سایت برچسب گذاری انتخاب کنید. برای مثال، برچسب‌گذاری نهایی N-را می‌توان مستقیماً پس از مونتاژ زنجیره پپتیدی با بیوتین جفت کرد، در حالی که برچسب‌گذاری زنجیره جانبی به استفاده از اسیدهای آمینه محافظت‌شده متعامد (مثلاً Lys(Mtt)) نیاز دارد، که به طور انتخابی محافظت می‌شوند و سپس با بیوتین جفت می‌شوند. برای توالی های حاوی چندین سایت واکنش، ما شرایط واکنش را برای اطمینان از برچسب زدن خاص بهینه کردیم.

03/

سنتز و اصلاح پپتید
ما از سنتز فاز جامد برای جمع آوری زنجیره پپتیدی گام به گام و معرفی بیوتین در موقعیت تعیین شده استفاده می کنیم. ما از مواد اولیه با کیفیت بالا و کنترل دقیق فرآیند برای اطمینان از کارایی هر مرحله کوپلینگ استفاده می کنیم. برای پپتیدهای بیوتینیله حاوی پیوندهای دی سولفیدی، ما از یک استراتژی اکسیداسیون هدفمند برای جلوگیری از عدم تطابق استفاده می کنیم.

04/

برش و تصفیه
پس از سنتز، پپتید از رزین جدا شد و گروه های محافظ جدا شدند. پپتید خام با HPLC آماده‌سازی تا خلوص هدف خالص شد. برای پپتیدهای نامحلول، ما شرایط تصفیه را برای اطمینان از عملکرد بهینه کردیم.

05/

کنترل کیفیت
تجزیه و تحلیل HPLC: برای تأیید اینکه خلوص مطابق با الزامات است
طیف سنجی جرمی (MS): تأیید می کند که وزن مولکولی صحیح است و تأیید می کند که بیوتین با موفقیت به آن متصل شده است.

06/

تحویل
پودر لیوفیلیزه و گزارش COA مفصل، از جمله تعداد قطعه مصنوعی، خلوص، وزن مولکولی، شرایط نگهداری و توصیه‌هایی برای استفاده ارائه دهید. همه داده ها را می توان برای انتشار یا گزارش ردیابی کرد.

 

page-800-1067
page-800-1067
page-800-1067

 

چرا خدمات پپتیدهای بیوتینیله شده Science-پپتید را انتخاب کنید؟

 

1. تجربه گسترده در نظافت
ما ده‌ها هزار پپتید بیوتینیله را سنتز کرده‌ایم که طیف وسیعی از مکان‌های برچسب‌گذاری، طول بازوهای فاصله‌گیر و ترکیب‌های اصلاحی را پوشش می‌دهند. چه یک برچسب زدن ساده باشد یا یک ترکیب پیچیده (مثلا بیوتین و فلورسین)، ما می توانیم با دقت به آن دست پیدا کنیم. مشتریان گزارش کرده اند که پپتیدهای بیوتینیله ما دارای پس زمینه کم و سیگنال قوی در ELISA و SPR هستند.


2. کنترل کیفیت دقیق
علاوه بر HPLC و MS معمولی، برای کاربردهای حیاتی، می‌توانیم اعتبارسنجی فعالیت بیوتینیله‌شده را برای اطمینان از قابلیت اطمینان هر دسته از پپتیدهای بیوتینیله در آزمایش‌های{0}در دنیای واقعی ارائه کنیم. ما همچنین از اعتبار سنجی NGS برای محصولات کتابخانه پشتیبانی می کنیم، اما برای تک پپتیدها، QC کافی است.


3. مقیاس تولید انعطاف پذیر
ما یک سیستم تولید پایدار از میلی‌گرم درجه تحقیقاتی تا گرم معرف‌های تشخیصی داریم و می‌توانیم آزمایش‌های سازگاری چندگانه-برای برآوردن-تحقیقات طولانی‌مدت یا نیازهای توسعه محصول ارائه دهیم. برای پپتیدهای بیوتینیله درجه GMP، ما همچنین یک سیستم تولید بالغ داریم.


4. تحویل سریع
سفارشات معمول پپتیدهای بیوتینیله (طول<30 aa, standard modifications) can be completed within 10-15 business days. Expedited service can be negotiated to 5-7 business days.


5. پشتیبانی فنی حرفه ای
مدیران پروژه ما پیشینه ای در شیمی پپتید دارند و می توانند در مورد انتخاب مکان برچسب گذاری، طراحی بازوی فاصله دهنده و پروتکل های کاربردی به شما مشاوره دهند. بسیاری از مشتریان ما اظهار داشته اند که توصیه های ما پس از اولین مشاوره بسیار کاربردی است و به آنها کمک کرده است تا از بسیاری از دام های رایج جلوگیری کنند.

 

پرونده های مشتری

 

A diagnostic reagent company needs a line of Biotinylated Peptides for autoimmune disease detection, N-terminal biotinylated, with PEG4 spacer arm, purity >95 درصد ما 5 گرم از محصول را با موفقیت تحویل دادیم که توسط ELISA با فعالیت خوب تایید شد و اکنون در کیت های تجاری سازی آنها استفاده می شود. متعاقباً چندین دسته از محصول را اضافه کرده اند که همه آنها از یک استاندارد هستند.

 

آزمایشگاه ایمونولوژی در آموزش عالی: مطالعه تشخیص اپی توپ سلول T نیازمند چندین پپتید همپوشانی بیوتینیله شده در مکان های مختلف است. ما 30 پپتید بیوتینیله را که در ترمینال N-یا C{3}} نشاندار شده بودند، سنتز کردیم و از آنها در تهیه تترامرهای MHC استفاده کردیم، که به آنها کمک کرد تا اپی توپ های جدید را با موفقیت شناسایی کنند، و نتایج مرتبط در مجله ایمونولوژی منتشر شده است.

 

یک شرکت داروسازی چندملیتی برای کشف داروی آنتی بادی نیاز به غربالگری کتابخانه های نمایش فاژ داشت و ما را مأمور ساخت پپتیدهای تقلیدی پروتئین هدف بیوتینیله کرد. ما یک کتابخانه پپتید حلقوی حاوی بیوتین- با ظرفیت کتابخانه 108 طراحی و سنتز کردیم که با موفقیت در برنامه غربالگری آنها استفاده شد و تاکنون چندین ترکیب سرب بدست آمده است.

 

امروز برای سفارشی کردن پپتیدهای بیوتینیله خود پرس و جو کنید

 

خواه به یک پپتید بیوتینیله N{0}ترمینال ساده برای ELISA نیاز داشته باشید یا به یک پپتید چند سایتی پیچیده برای سنجش مالتی پلکس، Science{1}}پپتید تخصص و دقت لازم را در خدمت شما دارد. تیم ما خوشحال است که قبل از شروع پروژه شما به طور عمیق با شما گفتگو کند تا اطمینان حاصل شود که طراحی کاملاً با نیازهای آزمایشی شما مطابقت دارد.