سنتز گلیکوپپتید

سنتز گلیکوپپتید|پپتیدهای گلیکوزیله|O-گلیکوپپتیدهای مرتبط|N-گلیکوپپتیدهای مرتبط|علم{2}}پپتید

به گلیکوپپتید برای تحقیقات گلیکوبیولوژی یا تقلید گلیکوپروتئین نیاز دارید؟ علم-خدمات سنتز پپتیدگلیکوپپتید، پیوند O-، N-و معرفی گلیکان های پیچیده را پوشش می دهد. 20 سال تجربه، کنترل دقیق سایت های گلیکوزیلاسیون. لطفا با ما تماس بگیرید.

چرا گلیکوپپتید می کنید؟
پروتئین ها به ندرت در بدن "برهنه" هستند - بیشتر حامل قند هستند. گلیکوزیلاسیون بر تاخوردگی پروتئین، ثبات، تشخیص و سیگنال دهی تأثیر می گذارد. اگر می خواهید عملکرد یک گلیکوپروتئین را مطالعه کنید یا یک آنتی بادی علیه اپی توپ گلیکان ایجاد کنید، داشتن یک پپتید برهنه کافی نیست، باید گلیکان ها را بچسبانید.

 

دشواری سنتز گلیکوپپتید در ساختار پیچیده خود زنجیره گلیکان و نیاز به اطمینان از محل صحیح و یکپارچگی زنجیره گلیکان هنگام اتصال به پپتید نهفته است. O-کونژوگه خوب است، اما N-زنجیره های گلیکان مزدوج بسیار طولانی تر هستند، که باعث می شود دشواری سنتز مستقیماً دو برابر شود. ما قبلاً در این چاله ها قدم گذاشته ایم و می دانیم چگونه آنها را دور بزنیم.

1. نوع گلیکوزیلاسیون: هر دو پیوند O- و N- ایجاد می‌شوند

بسته به اهداف تحقیقاتی شما، راهبرد گلیکوزیلاسیون مناسب‌تر است. اولین قدم در سنتز گلیکوپپتید، انتخاب زنجیره و پیوند قند مناسب است.

2. طول زنجیره قند: از مونوساکاریدها تا زنجیره های قندی پیچیده
اصلاح مونوساکارید: GlcNAc، GalNAc، Man، Gal و غیره، ساده ترین و موفق ترین.
دی ساکاریدها/تری ساکاریدها: به عنوان مثال لاکتوز، کیتوزان، باید توسط اهداکنندگان گلیکوزیل به خوبی محافظت شوند.
زنجیره های قند پیچیده: نوع مانوز بالا، N{0}}گلیکان پیچیده، تا نه قند.
سیالیلاسیون: پیوند نهایی به اسید سیالیک از محل شناسایی گلیکوپروتئین های طبیعی تقلید می کند.

3. کنترل نقطه: دقت، بدون حدس و گمان
بزرگترین ترس از گلیکوزیلاسیون چیست؟ گلیکوکونژوگه در محل اشتباه، یا یک سایت متصل است اما سایت دیگر متصل نیست. با استراتژی حفاظت متعامد خود، می‌توانیم گلیکوزیلاسیون را در یک مکان خاص معرفی کنیم و سایر مکان‌ها را دست نخورده باقی بگذاریم. آیا نیاز به گلیکوزیله کردن چندین سایت دارید؟ می توانیم آنها را یکی یکی معرفی کنیم و به وضوح کنترل کنیم.

4. خلوص: بسته به نیازهای تجربی

هر گلیکوپپتید با گزارش های HPLC و MS همراه است، با داده هایی که از یکپارچگی زنجیره گلیکان و محل صحیح پشتیبانی می کند.

5. سایر تغییرات روی گلیکوپپتیدها
گلیکوپپتیدها به تنهایی به اندازه کافی پیچیده هستند، اما برخی از آزمایشات به چیز دیگری نیاز دارند:
برچسب زدن فلورسنت: FITC، TAMRA، ردیابی مقصد گلیکوپپتید.
بیوتین: پایین-یا آزمایش کنید.
فسفوریلاسیون: شبیه سازی همزمان گلیکوزیلاسیون و فسفوریلاسیون برای مطالعه تداخل.
برچسب گذاری ایزوتوپی: برای NMR یا کمی سازی طیف سنجی جرمی.

1. گلیکوشیمی + سنتز پپتید، رویکرد دو-
سنتز گلیکوپپتید دشوار است زیرا از دو زمینه - گلیکوشیمی و سنتز پپتید عبور می کند. کسانی که شکر می سازند ممکن است پپتید را نشناسند و کسانی که پپتید می سازند ممکن است شکر را نشناسند. ما در هر دو طرف افراد داریم، اهداکننده گلیکوزیل را خودمان آماده می‌کنیم، شرایط گلیکوزیلاسیون را خودمان بهینه می‌کنیم، نیازی به برون‌سپاری نداریم و می‌توانیم مشکلات را خودمان تنظیم کنیم.

2. استراتژی های حفاظتی انعطاف پذیر و یکپارچگی زنجیره قند
در طول گلیکوزیلاسیون، خود زنجیره قند باید محافظت شود، در غیر این صورت شرایط واکنش قند را از بین می برد. ما ترکیب‌های مختلفی از گروه‌های محافظ داریم که می‌توانند زنجیره قند را در شرایط سنتز پپتید تثبیت کنند و سپس در مرحله نهایی قند را دست نخورده باقی بگذارند.

3. کنترل سایت: به هر کجا که می خواهید متصل شوید
گلیکوزیلاسیون Single Site: قند در یک مکان مشخص وارد می شود و در جای دیگر برهنه باقی می ماند.
گلیکوزیلاسیون چند سایت: سایت‌های مختلف می‌توانند زنجیره‌های قند مختلفی را حمل کنند، که می‌توانند یکی یکی بدون تداخل با یکدیگر معرفی شوند.
گلیکوزیلاسیون انتخابی: چندین Ser/Thr وجود دارد، تنها یکی از آنها گلیکوزیله است - که با استراتژی حفاظت به دست می‌آید، نه با احتمال.

4. QC: آیا زنجیره قند دست نخورده است؟ آیا سایت ها درست هستند؟
گلیکوپپتیدها برای کنترل کیفیت بیشتر از پپتیدهای معمولی مشکل ساز هستند:

وزن مولکولی ام اس: با نگاه کردن به آن می توانید متوجه شوید که قند چسبیده است یا خیر.
MS/MS برای دیدن محل (اختیاری): پپتید را بشکنید تا ببینید قند به کدام اسید آمینه متصل است.
HPLC برای مشاهده خلوص: همچنین به دنبال ناخالصی های قند زدایی باشید.
تجزیه و تحلیل ترکیب قند: اندازه گیری ترکیب زنجیره قند و پیوندها در صورت نیاز.
داده های مربوط به هر گلیکوپپتید به شما داده می شود، بنابراین لازم نیست حدس بزنید.

5. از میلی گرم تا صد میلی گرم، تا انتها
میلی گرم برای مرحله غربالگری، ده میلی گرم برای مرحله اعتبار سنجی، صد میلی گرم برای مطالعه ساختاری - ما می توانیم همه آن را مصرف کنیم. همان پروژه، همتای مشابه، نیازی به هماهنگ کردن مجدد نیست.

زیست شناسی ساختاری NMR/ساختار کریستالی زنجیره های قندی همگن گلیکوپروتئین، برچسب گذاری ایزوتوپی

• تحویل: پودر لیوفیلیزه، لوله یا ویال سانتریفیوژ، محافظت شده توسط نیتروژن.
• مدارک همراه: COA (نمایه HPLC + مشخصات MS)، MS/MS (تأیید سایت های گلیکوزیلاسیون).
• آزمایشات اختیاری: محتوای پپتید، اندوتوکسین، رطوبت، تجزیه و تحلیل ترکیب قند.
• بسته بندی سفارشی: تقسیم بندی و علامت گذاری بر اساس نیاز شما.
• هر محصول Glycopeptide Synthesis قبل از ارسال دوبار-بررسی می‌شود تا اطمینان حاصل شود که زنجیره قند کامل است و سایت‌ها درست هستند.

چه بخواهید گلیکوپپتیدهای ساده اصلاح شده با مونوساکاریدها یا گلیکان های پیچیده N-پیوند شده، می توانیم صحبت کنیم. حداقل لازم نیست وقتی از Science{2}}Peptide می‌خواهید سنتز گلیکوپپتید را انجام دهد، از هر دو طرف به دنبال شخصی بگردید.

من نیاز دارم که به من بگویید:
توالی های پپتیدی
محل های گلیکوزیلاسیون و ساختارهای زنجیره قند (مرجع بهتر است)
چقدر (میلی گرم)
الزامات خلوص

چه زمانی آن را می خواهید؟
در عرض 24 ساعت یک ارزیابی امکان سنجی و نقل قول به شما می دهد.